헨쇼의 직원 (하나의 조각에 대한 애플의 합성 `사만다`목소리의 도움의 손길과 함께!) 도시 트레일의 꿀벌에 큰 꿀벌 조각의 각각에 새겨진 설명의 오디오 판독을 만드는 바쁜 꿀벌되었습니다. 여기에 그들을 들어보십시오. 꿀벌 탐험가! 트레일 맵을 다운로드하여 집에서 인쇄합니다(x5 A4 페이지). 7월 23일 월요일부터 시티 허브의 다음 꿀벌에서 무료 트레일 지도를 수령하세요. 여행 하기 전에 장소 개장 시간을 확인 하시기 바랍니다. 또는, 사본은 출판사에서 직접 주문할 수 있습니다… 도심 도서 일단 당신이 꿀벌의 모든 수집 (또는 당신이 관리 할 수있는 만큼!) 인쇄하고 집에서 작성하는 A4 인증서를 다운로드합니다. 잘 하고 올 여름 도시에서 꿀벌 을 주셔서 감사합니다! 총 RNA는 Qiagen RNeasy 미니 키트(Qiagen, Valencia, CA, USA)를 사용하여 꿀벌 안테나로부터 분리되었다. 총 RNA 1 μg를 사용하여, cDNA를 인비트로겐 수퍼스크립트 III 효소(미국 그랜드 아일랜드)와 함께 올리고-dT로 합성하였다. 이어서, 정량적 실시간 PCR(qRT-PCR)은 스테원 플러스(어플라이드 바이오시스템즈, 포스터 시티, 캘리포니아, 미국)를 사용하여 다음 조건하에서 SYBR 그린 qRT-PCR 마스터 믹스(Fermentas, Ontario, Canada)를 사용하여 수행하였다: 5분 동안 95°C; 40 사이클은 30s에 대한 95°C, 30s에 대한 60°C, 30s에 대한 72°C. qRT-PCR용 프라이머는 표 S1에 기재되어 있다. 정량분석은 StepOne Plus 소프트웨어 V.
2.0(미국 캘리포니아 주 포스터시티, 포스터시티)으로 진행되었습니다. 결과는 2-ΔΔCt 방법79를 사용하여 검증된 대조군 유전자, Amrps49로 정규화되었다. 모든 생물학적 복제는 기술적 삼중항에서 수행되었다. 모험가가 되십시오 – 당신의 흔적을 트레일! 앱을 사용하면 꿀벌을 모으고, 보상을 잠금 해제하고, 트레일 진행 상황을 보고, 갤러리에 사진을 추가하고 소셜 미디어에 공유할 수 있습니다. 앱 스토어 또는 구글 플레이 (£ 1.99)*에서 응용 프로그램을 다운로드합니다. 상기 cDNA 합성은 전술한 바와 같이 실시되었다. 아피스멜라이프라의 후보 미강 수용체의 복제를 위해, PCR 증폭은 표적 유전자에 대한 유전자 특이적 프라이머 세트인 AmGr10(XM_006567733.1)을 이용한 타카라 엑스타크(Takara Shuzou, 교토, 일본)를 사용하여 수행하였다. 증폭 반응 (25 μl)에는 0.3 μl TaKaRa Ex-Taq, 2.5 μl 10x Ex-Taq 버퍼, 2 μl 2.5 mM dNTP 혼합물, 각 프라이머의 2 μl 5 pmol, 1 μl 템플릿 cDNA, 17.2 μl 멸균 물을 포함했다.
모든 증폭 반응은 다음과 같은 조건하에서 96 웰 열 사이클러 (응용 바이오 시스템, 포스터 시티, 캘리포니아, 미국)를 사용하여 수행되었다 : 3 분 동안 95 °C, 30 s의 경우 95 °C의 35 사이클, 30 초에 대한 61 °C, 1 분 30 초 동안 72 °C , 72°C에서 5분 동안 PCR 증폭 제품을 1.0% 아가로즈 겔에서 실행하고 DNA 시퀀싱에 의해 검증하였다. 이어서, QIAquick PCR 정제 키트(Qiagen, Valencia, CA, USA)에 의해 정제된 유전자를 T4 DNA 리가제(Promega, Madison, WI, 미국)를 사용하여 pGEM T-Easy 벡터(Promega, Madison, WI, USA)에 삽입하였다. 재조합 플라스미드를 유능한 대장균(DH5α) 세포로 형질전환하였다. 맨체스터의 행복한 창의성은 도시 주변에서 가장 큰 화제가 되었습니다. 장식, 초대형 노동자 꿀벌 조각의 식민지는 당신에게 재미와 매력의 9 주를 제공합니다. 수개월동안 생각하고, 토론하고, 만들고, 완성한 후, 예술가, 지역 사회 단체 및 젊은이들은 이 도시에서 가장 눈에 띄는 안경 중 하나에 대한 창의력을 발휘했습니다. 100개 이상의 개별 적인 디자인의 초대형 꿀벌과 130개 이상의 예술적 작은 꿀벌(도시 학습 프로그램의 꿀벌의 일환으로 제작)이 트레일을 따라 가면서 많은 즐거움을 선사합니다. 그레이터 맨체스터 전역에서 30,000명이 넘는 학생들과 단체들이 트레일을 위해 자신만의 리틀 비 조각품을 디자인했습니다. 그들은 지금 도시 전역의 장소에 전시되어 있습니다. 아래의 작은 꿀벌지도와 포스터를 다운로드하고 꿀벌 사냥에 가서! 1회: 대릴 샤프 ~ 8월.
